Au début de la troisième semaine (15 à 17 jours), un épaississement axial de l'épiblaste apparaît dans la partie caudale de l'embryon: c’est la ligne primitive. À partir de cette ligne, des cellules de l'épiblaste s'invaginent vers la face ventrale constituant l'endoblaste. Les cellules suivantes plongent transversalement entre ectoderme primaire et endoderme. Ces cellules qui s'insinuent ainsi entre les deux feuillets primitifs sont à l'origine du 3ème feuillet embryonnaire, le mésoblaste. La mise en place de la ligne primitive, de l'endoblaste et du troisième feuillet, le mésoblaste se font donc entre le quinzième et le dix‑septième jour.